REAKSI EDMAN
Reagensia Edman
Analisis untuk
N-terminal dapat diperoleh dengan mengolah peptida itu dengan fenil
isotiosianat (reagensia edman). Isotiosianat bereaksi dengan amino bebas
dengan sederet tahap yang akhirnya mrnghasilkan pemaksapisahan sam
amino N-ujung dari dalam peptidanya dan pembentukan suatu
feniltiohidantoin (PTH), suatu derivate asam amino yang dapat diisolasi
dan ditentukan cirinya. Reaksi pemaksapisahan dilakukan dengan pemanasan
zat-antara adisi dengan asam dalam suatu pelarut bebas air seperti
Nitrometana.
Dalam tiap tahap
residu N-ujung dapat dipatahkan sampai seluruh peptida itu terdegradasi
dan urutan asam aminop itu ditetapkan. Tetapi tiap siklus pembentukan
tiourea dan hidrolisis mengakibatkan suatu hidrolisis-dalam pada sisa
peptida itu. Setelah sekitar 20-30 siklus , hidrolisis peptida itu telah
cukup untuk menghasilkan banyak peptida lebih kecil, yang masing-masing
memiliki suatu residu N-ujung. Jadi Feniltiohidantoin tidak lagi
berasal dari suatu gugus ujung tunggal,tetapi merupakan campuran yang
berasal dari anekaragam gugus ujung.
Tujuan Reaksi Edman
Reaksi Edman
merupakan reaksi antara α-asam amino dengan fenilisotiosianat yang
menghasilkan derivat asam amino feniltiokarbamil. Dalam suasana asam
pelarut nitrometana yang terakhir ini mengalami siklisasi membentuk
senyawa lingkar feniltuihidantoin.
Reaksi Edman sering dipakai untuk penentuan asam amno N-ujung suatu rantai polipeptida.

Tidak ada komentar:
Posting Komentar